Glikoproteina Tamm-Horsfall łączy wrodzoną aktywację komórek immunologicznych z odpornością adaptacyjną poprzez mechanizm zależny od receptora Toll-4 ad 9

Odpowiedniki TF określono przy użyciu standardowej krzywej uzyskanej z tromboplastyny królika mózgu. EMSA. Ekstrakty jądrowe z DC przygotowano zgodnie z opisem (50, 51). Oligonukleotydy przypominające miejsce wiążące konsensus dla NF-kB (5a-AAGTTGAGGGGACTTTCCCAGGC-3a) i CRE (5a -AGAGATTGCCTGACGTCAGAGAGCTAG-3a) zakupiono od Santa Cruz Biotechnology Inc. Dwuniciowe oligonukleotydy stosowane we wszystkich eksperymentach były zakończone. -znakowany przy użyciu kinazy polinukleotydowej T4 i [32P] -ATP. Po znakowaniu, 5 .g ekstraktu jądrowego inkubowano z 120 000 cpm znakowanej sondy w obecności 3 .g poli (d1-dC) w temperaturze pokojowej przez 30 minut. Tę mieszaninę rozdzielono na 6% żelu poliakrylamidowym w buforze Tris / glicyna / EDTA przy pH 8,5. Eksperymenty kontrolne przeprowadzono zgodnie z opisem (51). Do kontroli przeprowadzono eksperymenty kompetycyjne z użyciem nieznakowanych NF-kB lub oligonukleotydów CRE. Statystyka. Poziomy cytokin porównywano za pomocą testów laboratoryjnych. PodziękowaniaTa praca została częściowo wsparta dotacjami (P14874-B08, GJ Zlabinger, P16788-B13, TM Stulnig) z Fonds zur Förderung der Wissenschaftlichen Forschung, Österreich, a także dotacjami z Centrum Medycyny Molekularnej (CeMM) , podstawowy instytut badawczy w spółkach Austriackiej Akademii Nauk (do TM Stulnig). Ponadto jesteśmy wdzięczni Wolfgangowi Zauner za syntezę peptydu hamującego TIRAP / Mal oraz Bianca Weissenhorn, Alessandrze Mathe i Margarethe Merio za doskonałą pomoc techniczną. Footnotes Obecny adres G. Stafflera i U. Ahsena to: Biovertis AG, Campus Vienna Biocenter 6, Wiedeń, Austria. MD Saemann i T. Weichhart w równym stopniu przyczynili się do tej pracy. Zastosowano niestandardowe skróty: EMSA, test zmiany ruchliwości elektroforetycznej; HUVEC, ludzkie komórki śródbłonka żyły pępkowej; IRAK-1, kinaza związana z receptorem IL-1; MLC, mieszana hodowla limfocytów; rh, zrekombinowany człowiek; TF, czynnik tkankowy; THP, glikoproteina Tamm-Horsfall; TLR, receptor Toll-like. Konflikt interesów: Autorzy zadeklarowali brak konfliktu interesów.
[więcej w: rak płaskonabłonkowy płuca, polana szymoszkowa basen, odchudzanie roku vita slim opinie ]
[patrz też: badania kontrolne po urlopie macierzyńskim, laserowe wybielanie zębów cena, szczepionki na meningokoki ]