Komórki dendrytyczne są genetycznie modyfikowane w celu ekspresji hamowania zapalenia stawów indukowanego kolagenem przez IL-4 ad 8

Analiza migracji DC wskazuje, że hamujący wpływ DC transdukowanych IL-4P na CIA koreluje z migracją DC do narządów limfoidalnych. Biorąc pod uwagę, że dożylna iniekcja jest bardziej skuteczna niż wstrzyknięcie podskórne, migracja DC do śledziony może być ważniejsza dla leczenia tego modelu niż ich migracja do pachwinowych węzłów chłonnych. Wniosek ten jest również zgodny z danymi pokazującymi, że wstrzyknięcie dootrzewnowe jest najbardziej skuteczne, ponieważ DC mogą migrować skutecznie do śledziony (jak również pachwinowych węzłów chłonnych) tą drogą. Po trzecie, CIA nie była hamowana przez transdukowane limfocyty T IL-4. lub przez transdukowaną IL-4p linię komórkową fibroblastów. Szczególnie pouczające jest to, że poliklonalne komórki T z transdukowanymi IL-4P nie hamowały CIA, pomimo ich zdolności do migracji do śledziony. Na podstawie tych wyników wnioskujemy, że zdolność stransdukowanych DC-IL-4 do modulacji CIA nie wynika z prostego dostarczania IL-4 do narządów limfoidalnych, ale może również wymagać specyficznych interakcji między śledzionowymi limfocytami T i IL-4. 4 wydzielające DC. Proponujemy, że wpływ stransdukowanej migracji DC przez IL-4P do narządów limfoidalnych ma generować zmienioną równowagę komórek Th1 / Th2 w śledzionie i przesunięcie w kierunku odpowiedzi Th2. Zdolność śledzionowych komórek T do wytwarzania IL-4 w odpowiedzi na anty-CD3 zwiększono po podaniu stransdukowanych DC IL-4P. Dlatego spekulujemy, że takie komórki Th2 w obrębie narządów limfatycznych hamują sąsiadującą chorobotwórczą odpowiedź Th1 w mikrośrodowisku i przyczyniają się do długotrwałego tłumienia artretycznej odpowiedzi immunologicznej Th1 in vivo. Takie efekty mogą wystąpić pomimo ciągłej obecności potencjalnie patogennych komórek Th1 w narządach limfoidalnych, jak wykazano przez zachowaną zdolność splenocytów do wytwarzania IFN-y. ex vivo po prowokacji CII (Figura 7). Wykazano, że genetycznie zmodyfikowane patogenne komórki T, które eksprymują IL-4 lub IL-10, łagodzą eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia (EAE), inną chorobę, w której pośredniczy Th1 (32, 33). Chociaż zarówno komórki T, jak i DC mają zdolność migracji do narządów limfatycznych lub miejsc choroby, ich mechanizmy wydają się zupełnie inne. Nasza strategia została zaprojektowana w celu modyfikacji lokalnych odpowiedzi limfocytów T poprzez przejściowe wprowadzanie stransdukowanych DC IL-4P, podczas gdy strategie, w których stosowano genetycznie zmodyfikowane patogenne komórki T, mają na celu ekspresję transdukowanego genu IL-4 lub IL-10 przez długi czas. w miejscach występowania chorób. Przejściowa ekspresja transdukowanego genu in vivo przez DC sugeruje, że to podejście może być bezpieczniejszym i bardziej fizjologicznym sposobem modulowania choroby autoimmunologicznej. Logiczną kwestią jest to, że DC mogą w pewnych warunkach zwiększyć patogenną odpowiedź immunologiczną. Jednak w naszym badaniu nasilenie choroby nie wzrosło nawet po podaniu kontrolnych DC. IL-4 jest tylko jednym z kilku genów, które wydają się mieć potencjał w leczeniu chorób autoimmunologicznych. Jak doniesiono, na przykład, rozpuszczalny receptor IL-15 zapobiega CIA (34). Aby przetestować jego zdolność terapeutyczną, wygenerowaliśmy rozpuszczalne DC transdukowane receptorem IL-15, ale nie zaobserwowano znaczącego wpływu na CIA po pojedynczym wstrzyknięciu tych komórek, podanym w 15 dniu po immunizacji CII (Y. Morita i DA Fox, niepublikowane dane). Wyniki te sugerują, że geny inhibitorów cytokin, które mogą wymagać długotrwałej ekspresji in vivo w celu uzyskania efektów terapeutycznych, mogą nie być optymalnymi kandydatami do leczenia chorób autoimmunologicznych za pomocą pojedynczych iniekcji transdukowanych DC. Niniejsze badania demonstrują skuteczność terapeutyczną stransdukowanych DC IL-4P do profilaktycznego leczenia choroby autoimmunologicznej. Konieczne będą dalsze badania, być może z użyciem bardziej przewlekłych zapalnych układów modelowych, przed rozważeniem ich zastosowania terapeutycznego w przewlekłych chorobach u ludzi, takich jak RA. Może to obejmować dodatkową modyfikację stransdukowanych DC IL-4P w celu zwiększenia ich zdolności immunoregulacyjnych. Wstrzyknięcie niepatogennego antygenu myszom po immunizacji stransdukowanymi DC IL-4P pulsowanymi tym samym antygenem może potencjalnie powodować wytwarzanie cytokin Th2 in vivo, co z kolei może silniej tłumić patogenną odpowiedź Th1. To podejście terapeutyczne, znane jako supresja uważności, okazało się skuteczne w EAE, w którym zastosowano immunizację KLH do indukowania niepatogennej odpowiedzi Th2 (35) i regulacji produkcji IL-10 (36), które przezwyciężyły chorobotwórczą odpowiedź Th1. Biorąc pod uwagę fakt, że patogenny antygen w RA jest nieznany (37) i biorąc pod uwagę oczywiste ryzyko wykorzystania takiego antygenu do immunoterapii, nawet jeśli jest on zidentyfikowany, to podejście wykorzystujące niepatogenny antygen może być bardziej realistyczne do zastosowania przez ludzi, w porównaniu z użyciem genetycznie zmodyfikowanych DC pulsowanych domniemanymi autoantygenami RA. Podsumowując, niniejszy raport demonstruje efekt terapeutyczny zmodyfikowanych genetycznie DC w eksperymentalnej chorobie autoimmunologicznej Nasze odkrycia sugerują, że DC modulowały odpowiedź autoimmunologiczną in vivo nie tylko poprzez dostarczenie transdukowanego immunoregulacyjnego produktu genu, ale także przez specyficzne interakcje z limfocytami T w tkankach limfoidalnych. Dzięki dalszemu zrozumieniu funkcji regulacyjnych DC i oceny alternatywnych podejść do modyfikacji DC, takich jak transdukcja innych genów immunoregulacyjnych lub zastosowanie antygenów, genetycznie modyfikowane DC mogą stać się silną opcją terapeutyczną do leczenia choroby autoimmunologicznej. Uwaga dodana w dowodzie. Niedawno Kim i współpracownicy stłumili CIA u myszy, stosując dożylną iniekcję DC zainfekowanych wektorem adenowirusowym, który eksprymował IL-4. (Kim, SH i wsp. 2001. Skuteczne leczenie ustalonego wywołanego kolagenem zapalenia stawów przez układowe podawanie komórek dendrytycznych modyfikowanych genetycznie w celu ekspresji IL-4 J. Immunol.166: 3499. 3505.) Podziękowania Dziękujemy E. Thomasowi z Immunex Corp. i S. Narula Schering-Plough do dostarczania odpowiednio rmGM-CSF i rmIL-4; G. Nolan dla linii komórek pakujących Phoenix; BJ Roessler i LJ Crofford za krytyczną lekturę rękopisu; oraz LK Myers, E. Parks i J. MacGregor za pomocną poradę. Praca ta została wsparta grantem badawczym od Fundacji Arthritis (do Y. Mority), przez granty od NIH (DK02349 do KT McDonagh i AR38477 do DA Fox), oraz przez Universytet Michigan w Wielozadaniowym Zapaleniu Stawów i Centrum Chorób Mięśniowo-szkieletowych.
[przypisy: balsam kapucyński ulotka, badania kontrolne po urlopie macierzyńskim, odchudzanie roku vita slim opinie ]
[podobne: centrum onkologii warszawa roentgena, kamikadze, rak płaskonabłonkowy płuca ]