Mutacje w ludzkim genie SC4MOL kodującym oksydazę sterolową powodują łuszczycowe zapalenie skóry, małogłowie i opóźnienie rozwojowe cd

Suplementacja pożywki hodowlanej z dodatkiem 1. M mikonazolu, silnego inhibitora lanosterolu 14. demetylaza (CYP51, powyżej SMO) w pożywce z niedoborem cholesterolu i 5. M symwastatyna, związek, który znacząco zmniejsza cholesterologenezę poprzez hamowanie reduktazy HMG-CoA, obniżył poziomy metylosteryny u pacjentów fibroblastów z 2% całkowitego cholesterolu do 0,9% i 0,5 %, odpowiednio. Rycina 2 Profile punktowe próbek pacjentów i analiza mutacji SC4MOL w próbkach macierzystych i probandowych. Ogólny profil jonów GC-MS wyciągów sterolowych skóry pacjenta (A), skóry kontrolnej (B), osocza pacjenta (C) i osocza kontrolnego (D). Rzędne są odpowiedzią detektora, a odcięte są czasem wymywania. Numerowane związki to: 1, cholesterol; 2, cholestanol; 3, 8 (9) -cholestenol; 4, desmosterol plus 7-dehydrocholesterol; 5, lathosterol; 6, niezidentyfikowany monometylsterol; 7, kampesterol; 8, 4 (3-metylo-5-cholest-8 (9) -en3-jol; 9, dihydrolanosterol; 10, 4a-metylo-5a-cholest-7 (8) -en3-jol; 11, niezidentyfikowany izomer 4,4-a-dimetylo-5a-cholesta-8 (9) -en-3a-ol; 12, 4,4 p-dimetylo-5 8 -cholesta-8 (9) -en3-jol; 13, 4,4 (3-dimetylo-5 (3-cholesta-8 (9), 24-dien-3 (3-ol, 14, sitosterol. Wzory fragmentów jonowych każdego piku metylowego sterolu przedstawiono w Notatce dodatkowej. Zwróć uwagę, że praca kolumny dla czasu elucji w osoczu jest nieznacznie przesunięta w porównaniu z próbkami skóry. Poziomy dimetylosteroli i monometylololi były znacznie zwiększone w skórze pacjenta. Dimetylsterol (piku 6) jest najbardziej podwyższony w skórze, co sugeruje preferencyjną akumulację 4,4-dimetylosteroli w skórze pacjenta. Brak 4-karboksysterolu w skórze wyklucza możliwy defekt w NSDHL. (E) Zidentyfikowano dwie mutacje w SC4MOL zarówno z gDNA, jak i cDNA wyekstrahowanego z leukocytów krwi obwodowej: 519T. A (góra) i 731A. G (dół). 519T A zidentyfikowano również w gDNA od ojca pacjenta, a 731A (3G zidentyfikowano u matki. Tabela Wzrost fibroblastów pacjentów i kontrolnych na normalnym (10% FBS) i pożywce zubożonej w cholesterol Dane te silnie wskazywały blok na etapie SMO w szlaku syntezy cholesterolu. Ponieważ nie ma zatwierdzonego testu enzymatycznego ani substratu dostępnego dla SMO, zsekwencjonowaliśmy gen SC4MOL przewidywany do kodowania tego enzymu. Zidentyfikowano dwie odmiany z opublikowanej sekwencji (NM_006745): 519TA A i 731 A (3 kodujące odpowiednio H173Q i Y244C w białku SMO (Figura 2E). Mutacja 519T AA była przenoszona przez ojca pacjenta, a mutacja 731A. G była obecna u matki. Obie pozycje kodują aminokwasy, które występują w wysoce konserwatywnych domenach wiążących metal w SMO (Suplementowa Figura 1) i żaden z wariantów nie został zidentyfikowany w żadnej z baz danych dla wspólnych SNP. Ponadto, H173Q zmienia przewidywane miejsce aktywne obejmujące drugi motyw wiążący żelazo enzymu. Przewiduje się, że obie mutacje będą prawdopodobnie szkodliwe. przez pakiet oprogramowania PolyPhen (http://genetics.bwh.harvard.edu/pph/), z wynikiem 2,5 dla mutacji Y244C i 3,2 dla mutacji H173Q. Żadna z mutacji nie została zidentyfikowana w 2876 allelach z kontroli populacji. Nie były również obecne w publicznych bazach danych SNP (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp) lub 1000 Genomes (http://browser.1000genomes.org/index.html). Zatem warianty te są wyjątkowo rzadkie w populacji ludzkiej. Ponieważ zaobserwowano nieznacznie podwyższone metylosterydy u pacjentów z zespołem CHILD (niedobór NSDHL), zsekwencjonowaliśmy również cDNA z genu NSDHL i nie znaleziono żadnych mutacji. Poziomy metylostearylu również wzrosły (choć mniej) w osoczu rodziców pacjenta (tabela 2), w szczególności u ojca, który przenosi mutację aktywnego miejsca H173Q, co sugeruje subkliniczny efekt w stanie heterozygotycznym. Po 3 miesiącach suplementacji cholesterolu poziom metylosteryny u pacjenta zmniejszył się o około 20%, a poziom cholesterolu w osoczu znacznie się poprawił, osiągając poziom zbliżony do dolnego zakresu prawidłowego, ale poziom metylsterolu nie zmniejszał się wraz z dłuższym leczeniem (Tabela 2). Tabela 2 Analiza steroli w osoczu krwi; pacjent przed suplementacją cholesterolu; pacjent po 3 miesiącach suplementacji cholesterolu; a matka i ojciec pacjenta nadproliferacja w niedoborze SMO. Wcześniejsze badania komórek rozrodczych wykazały działanie MAS aktywujące mejozę, ale wpływ MAS na regulację cyklu komórkowego i mitozy jest nieznany (11, 12). Fakt, że mutacje w DHCR14B / LBR, SC4MOL, NSDHL i EBP lub jego mysich homologach powodują nadmierną proliferację choroby skóry, skłonił nas do zbadania proliferacji komórek w fibroblastach skóry od naszego pacjenta (Figura 3, AOC)
[patrz też: kamikadze, szczepionki na meningokoki, pompa insulinowa refundacja ]
[podobne: olej lniany na odchudzanie, niedobór witaminy d3 objawy u dorosłych, przygotowanie do rektoskopii ]