Regulacyjna rola DR4 w spontanicznym modelu transgenicznym cukrzycy DQ8 czesc 4

Wprowadzenie transgenu RIP-B7.1 do DR4 + / mII. myszy spowodowały rozwój spontanicznej cukrzycy u 25% (5 z 20) myszy DR4 + / mIIa / RIP-B7.1. Podobnie jak myszy DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1, nie było preferencji seksualnych, a rozwój choroby nastąpił z podobną kinetyką u myszy DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 (Figura 2). Jednakże ogólna częstość występowania cukrzycy u myszy DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 była znacznie niższa niż w myszach DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1 (Figura 2). Częstość występowania cukrzycy była trzykrotnie wyższa u myszy DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1 (73%, 11 z 15) (Figura 2), które są wartościami podobnymi do tych z naszego ostatniego raportu (34). Szczególnie interesujące, gdy DR4 wprowadzono do myszy DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1, częstość występowania cukrzycy została znacznie zmniejszona do poziomu podobnego do stwierdzanego u myszy DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 (23%). ; 5 z 22) (rysunek 2). Figura 2. Rozwój cukrzycy spontanicznej u myszy transgenicznych HLA / RIP-B7. W badaniu wskazano cztery grupy myszy. Liczba myszy na grupę wynosiła: n = 15 (7 kobiet i 8 mężczyzn) dla DQ8 + / mIIa / RIP-B7; n = 20 (11 kobiet i 9 mężczyzn) dla DR4 + / mlla / RIP-B7; n = 22 (12 kobiet i 10 mężczyzn) dla DQ8 + DR4 + / mlla / RIP-B7; n = 10 (4 kobiety i 6 mężczyzn) dla myszy mIIa / RIP-B7. Myszy trzymano w warunkach wolnych od patogenów (SPF). Cukrzycę określono przez monitorowanie stężenia glukozy w moczu i potwierdzono glukozy we krwi (> 250 mg / dl). Żadna z mysich myszy z klasą II MHC klasy II (DR4 + / mII + / RIP-B7.1 lub DQ8 + DR4 + / mII + / RIP-B7.1) nie rozwinęła cukrzycy (dane nie przedstawione). Podobnie jak w poprzednich doświadczeniach, jedna z dziesięciu (10%) myszy myszy RIP-B7.1 z niedoborem MHC klasy IIa (mllA / RIP-B7.1) również rozwinęła cukrzycę (Figura 2). Mniejsza liczba limfocytów T CD8 + występuje w trzustkowych wysepkach myszy z cukrzycą DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 i DQ8 + DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 w porównaniu z cukrzycowymi myszami DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1. Trzustki myszy z rozwiniętą cukrzycą analizowano pod kątem naciekania limfocytarnego za pomocą barwienia immunohistochemicznego. Chociaż liczba obwodowych komórek T CD8 + była bardzo podobna pomiędzy myszami DQ8 + / mllpR-R7-B7.1 i DR4 + / IL-a / RIP-B7.1, okazało się, że mniej komórek T CD8 + znaleziono w cukrzycowej DR4 + / mII. / Nacieki wysepek RIP-B7.1 niż te, które obserwowano w infiltratach wysp trzustkowych DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1 (Figura 3). Mniejsza liczba nacieków limfocytów T CD8 + była również obserwowana u cukrzycowych myszy DQ8 + DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 (Figura 3). Jednakże w tym przypadku koekspresja DQ8 i DR4 prowadzi do lepszej selekcji i dojrzewania limfocytów T CD4 + (patrz powyżej) na mysim tle niedoboru MHC klasy IIa; dlatego stosunek CD4 / CD8 u myszy DQ8 + DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 jest względnie większy niż u myszy DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1 i DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 . Figura 3 Immunohistochemiczne barwienie skrawków trzustki u myszy z cukrzycą, z cukrzycową myszą DQ8 + / mIIa / RIP-B7 w górnym panelu, cukrzycową myszą DR4 + / mIIa / RIP-B7 w środkowym panelu i cukrzycową DQ8 + DR4 + / mII. / Mysz RIP-B7 na dolnym panelu. Nacieki wysepek barwiono na limfocyty T CD4 + (po lewej), limfocyty T CD8 + (środkowe) i B220 + B (po prawej). Zapalenie insuliny i / lub cukrzycę można przenosić przez splenocyty cukrzycowe myszy DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 lub DQ8 + DR4 + / mIIa / RIP-B7.1. Ponieważ ekspresja transgenu RIP-B7.1 jest wymagana dla adopcyjnego modelu transferu w transgenicznych układach RIP-B7.1 (34, 40, 41), biorcami adoptywnego transferu w tym badaniu byli transgen pozytywny dla RIP-B7.1. . Pokazaliśmy, że cukrzycowe splenoktyle DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1 mogą adoptatywnie przenosić cukrzycę na napromieniowanych syngenicznych biorców (34). W podobny sposób limfocyty śledzionowe (zubożone z erytrocytów) myszy z cukrzycą DR4 + / mllA / RIP.B7-1 i DQ8 + DR4 + / mllA / RIP-B7.1 zostały w sposób adoptywny przeniesione do podświetlonego na słońcu DR4 + / mII p / RIP. Myszy B7-1 i DQ8 + DR4 + / mIIa / RIP-B7.1, odpowiednio. Eksperymenty zakończono 8 tygodni po adopcyjnym przeniesieniu. Cukrzyca rozwinęła się u 38% biorców DR4 + / mIIa / RIP.B7-1 (trzy z ośmiu, 4, 6 i 6 tygodni po transferze), którzy otrzymali splenocyty cukrzycowe DR4 + / mII. / RIP.B7-1 oraz w czterech z ośmiu (50%, 4, 5, 6 i 6 tygodni po transferze) od biorców DQ8 + DR4 + / mllp / RIP-B7.1 z podaniem splenocytów DQ8 + DR4 + / mllA / RIP-B7.1 z cukrzycą. Rekonstytucja zapalenia wsierdzia przez bez cukrzycy komórki BM z myszy DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1, DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 i DQ8 + DR4 + / mIIa / RIP-B7.1. Aby ocenić rolę pochodzących od BM ludzkich komórek MHC klasy II + w rozwoju choroby, wygenerowaliśmy chimerę BM przez przeniesienie komórek BM (po zubożeniu erytrocytów) z myszy transgenicznych MHC klasy II + / RIP-B7.1 (8 do 12 tygodni wiek) do letalnie napromienionych transgenicznych biorców ludzkiego MHC klasy II (3 / RIP-B7.1 (10 do 12 tygodnia życia, n = 3. 5 / grupa). Naszym celem było zbadanie fazy przedcukrzycowej w tych eksperymentach i wybraliśmy 8 tygodni jako okres obserwacji
[hasła pokrewne: kamikadze, laserowe wybielanie zębów cena, przygotowanie do rektoskopii ]
[podobne: ile kalorii ma mozzarella, profilaktin koncentracja, paznokcie w kształcie migdałów ]