Sieć zależna od kwasu retinowego w przednim obiegu kontroluje tworzenie mysiego płuca ad 6

Wydaje się, że w przypadku niedoboru RA aktywacja sygnalizacji Wnt może wywołać tylko tworzenie pączków pomimo dwustronnej ekspresji Fgf10. Zarówno aktywacja Wnt, jak i Tgf. hamowanie jest wymagane w celu ratowania powstawania pączków płucnych w przedrakach z niedoborem RA. Wcześniej donieśliśmy, że zakłócenie sygnalizacji RA powoduje hiperaktywację Tgf. droga w mezodermie przednim jelita. Pokazaliśmy także, że antagonizujemy Tgf. u chorych z niedoborem RA tylko gryzonie uratowały pączek płucny, podobnie jak przedgrzybiony z RA pozbawiony aktywatorów Wnt (11). Czy uzasadniliśmy to poprawieniem zmian w Wnt i Tgf. sygnalizacja niedoczynności RZS z deficytem może ratować morfogenezę płuc po obu stronach. W związku z tym przeanalizowaliśmy przerzuty pozbawione RA, w których jednocześnie aktywowaliśmy Wnt, stosując rekombinowany Wnt3a w kulkach lub inhibitor Gsk3b, jednocześnie hamując Tgfc. sygnalizacja za pomocą Tgf. antagonistę receptora SB431542 (28) lub specyficzny dla pęczka Tgf. blokujące przeciwciało (200 .g / ml, pozycje 11, 29). Co uderzające, pączki płucne wykazujące ekspresję Nkx2-1 (3 obserwowano obustronnie w przednim jelicie zarówno w genetycznym, jak i farmakologicznym modelu niedoboru RA (fig. 6, A i E). Rysunek 6Tgf. hamowanie i aktywacja Wnta w pełni ratują pąki płucne w warunkach z niedoborem RZS. (A. H) Dodanie Tgf. blokujące przeciwciało (TAb) i kulkę Wnt3a do poddanych BMS preparatów wstępnych wywoływały tworzenie obustronnych pączków płucnych (A i B, groty strzałek), które były związane z lokalnym ratowaniem Fgf10 (C i D, groty strzałek i obszary w kółku). Podobne ratowanie miejscowego pączkowania (E. G) i ekspresji Fgf10 (H) obserwowano w Raldh2. /. foreguts leczone Tgf. antagonistę receptora 1, SB4 i inhibitor Gsk3b. Odpowiednie barwienie H & E pokazano w B i G. Oryginalne powiększenie, × 20 (A, prawo, B i F); × 10 (D i H). Pasek skali: 250 .m. Ratunek był najbardziej skuteczny, gdy Tgf. blokujące przeciwciało i Wnt3a zostały połączone. Ta kombinacja dawała wyraźnie wyraźne ogniska ekspresji Fgf10 i dobrze wydłużonych pąków płucnych (11 z 11, Figura 6, A (D). Wydłużenie pąka było mniej znaczące, gdy inhibitor Gsk3b został użyty do aktywacji Wnt (5 z 7, Figura 6, E (H). Można to tłumaczyć mniej skutecznym hamowaniem Tgf. szlak, a tym samym mniejszy wzrost, w obecności inhibitora Gsk3b. Rzeczywiście, endogenny Gsk3b może działać jako negatywny regulator Tgf. sygnalizacja (30). Tak więc wydaje się, że RA jest krytyczne w przednim jelicie w kontrolowaniu co najmniej 3 głównych szlaków, Tgfc, Wnt i Fgf, w celu umożliwienia właściwego tworzenia się primordium płucnego. Dyskusja Poniżej przedstawiamy dowody na to, jak sądzimy, nowy mechanizm łączący sygnalizację RA z Wnt, Tgfp i Fgf10 podczas indukcji pączka płuca. Obraz wyłaniający się z naszego badania to obraz RZS będący głównym sygnałem regulatorowym integrującym wiele szlaków w przednim jelicie, aby umożliwić rozszerzonym progenitorom dróg oddechowych rozszerzenie i utworzenie primordium płucnego (Figura 7). Ryc. 7 Sieć zależna od RA w przednim obiegu kontroluje tworzenie się primordium płucnego. Podczas pierwotnej morfogenezy pączka płuc sygnalizacja RA w mezodermie przednim pozwala na indukcję szlaku Wnt przez tłumienie ekspresji Dkk1; RA także hamuje Tgf. sygnalizacja. Zrównoważona aktywność Wnt i Tgf. prowadzi do właściwej mezodermalnej ekspresji Fgf10 wymaganej do tworzenia primordium płucnego. W endodermie przednie, regulacja RA Dkk1, a ostatecznie Wnt, przyczynia się do utrzymania losu komórek progenitorowych płuc. RA może również wpływać na odpowiedź endodermy przednie na Fgf10, przypuszczalnie przez Tgf. cel asymetrycznie rozmieszczony w lewym i prawym aspekcie endodermy. Analiza myszy reporterowych RARElacZ podczas wczesnej organogenezy ujawnia silny i względnie jednorodny wzorzec aktywacji RA w całym przednim jelicie (10, 31). Ten wzór kontrastuje ze zlokalizowanym wpływem endogennego RA w różnych pochodnych foregut, co sugeruje regulację RA sieci lokalnych. Nasze badanie sugeruje, że, przynajmniej dla rozwijającego się płuca, efekt ten osiąga się poprzez koordynacyjną modulację szlaków Wnt, Tgfp i Fgf. Wyraźne sygnały BATgal w polach płuc i tarczycy w wyściółkach kontrolnych i selektywna eliminacja tych sygnałów w płucach w przedrakach z niedoborem RA (Figura 2, E (H) wspierają pozytywną rolę endogennego RA w regulowaniu kanonicznego Wnt miejscowo podczas indukcji z zawiązków płucnych. Co godne uwagi, endogenny RA w tym samym czasie negatywnie reguluje Tgf. sygnalizacja w przednim jelcu. Wcześniej wykazaliśmy, że zakłócenie RA powoduje powszechną aktywację Tgf. sygnalizacja i jej cele w przednim mezodermie (11)
[podobne: balsam kapucyński ulotka, osocze bogatopłytkowe opinie, kamikadze ]
[hasła pokrewne: polana szymoszkowa basen, ile kalorii ma mozzarella, profilaktin koncentracja ]