Supresor sygnalizacji a1 (SOCS1) cytokiny jest nowym celem terapeutycznym dla indukowanego przez enterowirusa uszkodzenia serca ad 7

Aby przetestować tę hipotezę, wygenerowaliśmy wektor AAV do ekspresji dnSOCS1 znakowanego Myc. DnSOCS1 destabilizuje zarówno endogenny SOCS1, jak i SOCS3 i wzmacnia sygnalizację JAK-STAT (33). Wzmacnia to sygnalizację JAK-STAT, która występuje przy stymulacji receptora IFN lub gp130. Wektor AAV wyrażający dnSOCS1 lub, jako kontrolę, LacZ, był wstrzykiwany bezpośrednio do serca. Dwa tygodnie po przeniesieniu genu myszy zaszczepiono CVB3. Rozległość uszkodzenia mięśnia sercowego badano za pomocą wychwytu barwnika niebieskiego Evansa 5 dni po zakażeniu (ponieważ myszy były o 2 tygodnie starsze niż te wcześniej badane, ich śmiertelność była niższa). Ekspresję dnSOCS1 i LacZ określono przez immunobarwienie odpowiednio przeciwciałami anty-Myc lub anty-galaktozydazą. W obszarach mięśnia sercowego, które wyrażały dnSOCS1, prawie nie było barwienia błękitem Evansa. (Figura 6, a c), podczas gdy barwienie błękitem Evansa w obszarze mięśnia sercowego, który eksprymował LacZ nie różniło się od obszarów nie transdukowanych wektorami AAV (Figura 6, df). Ilościowa ocena trzech oddzielnych sekcji u każdej z trzech myszy z każdej grupy wykazała znaczącą różnicę między dwiema grupami (Figura 6g). Jak wykazano wcześniej (Figura 1d), barwienie błękitem Evansa kolokalizowano przez infekcję wirusową i nie było znaczących dowodów na infekcję CVB3 w obszarze mięśnia sercowego, który wyrażał dnSOCS1 (dane nie przedstawione). Zatem hamowanie SOCS w mięśniu sercowym skutecznie zapobiegało wywołanemu przez CVB3 ostrym uszkodzeniem mięśnia sercowego i hamowało replikację wirusa. Odkrycia te pokazują, że strategie mające na celu hamowanie SOCS mogą wzmacniać wrodzone działania antywirusowe cytokin stymulujących aktywację JAK-STAT. Figura 6 Ekspresja DnSOCS1 kierowana przez AAV hamuje efekt cytopatyczny, w którym pośredniczy CVB3. Sercom myszy bezpośrednio wstrzyknięto AAV Myc-tagged dnSOCS1 lub AAV LacZ. Dwa tygodnie później myszy zainfekowano CVB3. Pięć dni po zakażeniu skrawki mięśnia sercowego wybarwiono przeciwciałami przeciwko Myc (a) lub anty-galaktozydazą (d). Pobór błękitu Evans zbadano w tej samej sekcji (b i e). Połączone obrazy (c i f) pokazują, że w obszarach, w których występuje ekspresja dnSOCS1, brak jest przerwania błony spowodowanego zakażeniem wirusem, w porównaniu z obszarami mięśnia sercowego, które wyrażają LacZ. Procentowy obszar barwienia błękitem Evansa w obszarach mięśnia sercowego, które wybarwiały wynik dodatni dla dnSOCS1 lub LacZ, określono ilościowo dla trzech myszy na grupę (g) i znacznie zmniejszył się w obszarach wyrażających dnSOCS1 w porównaniu z obszarami wyrażającymi LacZ. Wyniki przedstawiono jako średnie. SE. * P <0,01 dla porównania z obszarami przejściowymi LacZ. Skalowane pręty: mm (a. F). Dyskusja Skupiliśmy się na roli SOCS jako regulatorów ujemnego sprzężenia zwrotnego sygnalizacji JAK i ich roli we wrodzonej obronie gospodarza w mięśniu sercowym przed infekcją wirusową. Wykazaliśmy, że sygnalizacja JAK-STAT jest aktywowana w sercu zainfekowanych myszy i jest wymagana do wczesnej wrodzonej obrony przed infekcją enterowirusową w sercu. Chociaż oczywiste jest, że komórkowa odpowiedź immunologiczna jest ważną obroną przed infekcją wirusową kardiotropowymi wirusami (5, 34), wyniki te demonstrują znaczenie wrodzonego systemu obrony antywirusowej w mięśniu sercowym. Ponieważ aktywacja JAK-STAT występuje przed znaczną infiltracją z jednojądrzastych limfocytów, wydaje się, że odgrywa kluczową rolę w kontrolowaniu replikacji wirusa na wczesnych etapach infekcji wirusowej (Figura 7a). Figura 7: Przeciwwirusowa defektywność ANK-STAT w mięśniu sercowym i hamowanie SOCS w celu ograniczenia wczesnego wywołanego wirusem uszkodzenia serca. (a) Zakażenie wirusem w sercu stymuluje sygnalizację receptora cytokiny za pośrednictwem szlaku JAK-STAT. Aktywacja szlaku JAK-STAT indukuje transkrypcję genów docelowych przeciwwirusowych, stymulując wrodzoną obronę wirusową w mięśniu sercowym. (b) Podczas gdy aktywacja szlaku JAK-STAT odgrywa ważną rolę w obronie przeciwwirusowej, fosforylowane STAT indukuje również ekspresję SOCS, która osłabia wrodzoną obronę przeciwwirusową przez hamowanie sygnalizacji JAK. Podobnie jak w myszach transgenicznych SOCS1, zwiększona ekspresja SOCS w miocytach sercowych powoduje silną replikację wirusa i uszkodzenie serca. (c) Strategie mające na celu hamowanie SOCS nasilają wrodzone działania antywirusowe cytokin, które wykorzystują szlak JAK-STAT, prowadząc do zapobiegania urazowi mięśnia sercowego, w którym pośredniczy wirus. P, fosforylowane. Infekcja wirusowa indukuje ekspresję cytokin, które aktywują sygnalizację JAK. takie jak cytokiny związane z IFN - (3 (3, IFN-a, gp130 (CT-1, IL-6), IL-10 i IL-12. we wczesnych stadiach zapalenia mięśnia sercowego (35. 39) [więcej w: odchudzanie roku vita slim opinie, ból piszczeli po bieganiu, laserowe wybielanie zębów cena ] [więcej w: depilacja laserowa twarzy, badania kontrolne po urlopie macierzyńskim, laserowe wybielanie zębów cena ]