Komórki dendrytyczne są genetycznie modyfikowane w celu ekspresji hamowania zapalenia stawów indukowanego kolagenem przez IL-4 ad 5

Myszy immunizowano CII w dniu 0. W dniu 15, myszy otrzymały zastrzyki podskórne (sc) (n = 8), dożylne (iv) (n = 7) lub dootrzewnowe (ip) (n = 8) 3 x 105 DC-trans transdukowany IL-4P. Wstrzyknięcie podskórne wykonano na prawym i lewym boku z 1,5 x 105 komórek w każdym boku. Kontrolnym myszom (n = 8) podano podskórnie HBSS. Zapalenie stawów było monitorowane przez ślepego obserwatora, a punktację kliniczną oceniano zgodnie z opisem w Metodach. Continue reading „Komórki dendrytyczne są genetycznie modyfikowane w celu ekspresji hamowania zapalenia stawów indukowanego kolagenem przez IL-4 ad 5”

Regulacyjna rola DR4 w spontanicznym modelu transgenicznym cukrzycy DQ8 czesc 4

Wprowadzenie transgenu RIP-B7.1 do DR4 + / mII. myszy spowodowały rozwój spontanicznej cukrzycy u 25% (5 z 20) myszy DR4 + / mIIa / RIP-B7.1. Podobnie jak myszy DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1, nie było preferencji seksualnych, a rozwój choroby nastąpił z podobną kinetyką u myszy DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 (Figura 2). Jednakże ogólna częstość występowania cukrzycy u myszy DR4 + / mIIa / RIP-B7.1 była znacznie niższa niż w myszach DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1 (Figura 2). Częstość występowania cukrzycy była trzykrotnie wyższa u myszy DQ8 + / mIIa / RIP-B7.1 (73%, 11 z 15) (Figura 2), które są wartościami podobnymi do tych z naszego ostatniego raportu (34). Continue reading „Regulacyjna rola DR4 w spontanicznym modelu transgenicznym cukrzycy DQ8 czesc 4”

Mutacje receptora melanokortyny-4 są częstą i niejednorodną przyczyną chorobliwej otyłości cd

Geny wariantu i typu dzikiego amplifikowano z genomowego DNA przy użyciu starterów MC4AF i MC4ER i klonowano do wektora ekspresyjnego pcDNA3 / MC4-R / V5 / His / Topo (Invitrogen, Carlsbad, California, USA). Analiza PCR-RFLP. Dla każdego wariantu, w którym stwierdzono mutację zmiany ramki odczytu lub missense, zaprojektowano test PCR-RFLP. Jednoniciowe startery polimorfizmu (SSCP) zastosowano do amplifikacji, gdy stwierdzono mutację wprowadzającą lub usuwającą miejsce restrykcyjne dla dostępnego w handlu enzymu restrykcyjnego. W przypadku innych mutacji, primery z niedopasowaniem sekwencji w 3. Continue reading „Mutacje receptora melanokortyny-4 są częstą i niejednorodną przyczyną chorobliwej otyłości cd”

Mutacje w ludzkim genie SC4MOL kodującym oksydazę sterolową powodują łuszczycowe zapalenie skóry, małogłowie i opóźnienie rozwojowe

Defekty w syntezie cholesterolu wywołują wiele różnych objawów, od śmiertelności noworodków do względnie łagodnych cech dysmorficznych i opóźnienia rozwojowego u osób z zespołem Smitha-Lemli-Opitza. Podajemy tutaj identyfikację mutacji w genie sterol-C4-metylo oksydazy (SC4MOL) jako przyczynę autosomalnego zespołu recesywnego u człowieka z łuszczycowym zapaleniem skóry, bólem stawów, wrodzoną zaćmą, małogłowiem i opóźnieniem rozwojowym. Gen ten koduje oksydazę sterol-C4-metylową (SMO), która katalizuje demetylację C4-metylosteroli w szlaku syntezy cholesterolu. C4-Metylsterole są sterolami aktywującymi mejozę (MAS). Występują w wysokich stężeniach w jądrach, a jajniki i odgrywają rolę w aktywacji mejozy. Continue reading „Mutacje w ludzkim genie SC4MOL kodującym oksydazę sterolową powodują łuszczycowe zapalenie skóry, małogłowie i opóźnienie rozwojowe”

Mutacje w ludzkim genie SC4MOL kodującym oksydazę sterolową powodują łuszczycowe zapalenie skóry, małogłowie i opóźnienie rozwojowe ad 8

Próbki kontrolne stosowane do genotypowania nowych wariantów uzyskano z inicjatywy National Genetic of Human Genetics Initiative. Wszystkie kontrole (1 452 próbki) stanowiły dorosłe samce pochodzenia europejskiego, które poddano badaniom przesiewowym w celu wykluczenia zaburzeń psychicznych. Ponadto na każdej badanej płytce uwzględniono również pozytywne kontrole i ujemne kontrole wodne. Genotypowanie przeprowadzono za pomocą niestandardowego testu genotypowania TaqMan SNP z Applied Biosystems zgodnie z instrukcjami producenta. Startery i sondy zaprojektowano zgodnie z Custom Custom TaqMan SNP Genotyping Assay Protocol (Applied Biosystems). Continue reading „Mutacje w ludzkim genie SC4MOL kodującym oksydazę sterolową powodują łuszczycowe zapalenie skóry, małogłowie i opóźnienie rozwojowe ad 8”

Wydzielone białko 4 związane z białkami szprotu jest silnym czynnikiem fosfatycznym pochodzenia nowotworowego ad 7

Aby określić mechanizm działania sFRP-4 w nerkach, mierzono stężenia. -Keteniny lub fosforylowanej .-keteniny w sFRP-4. lub nerki traktowane nośnikiem in vivo. Jak pokazano na Fig. 5, szczury w infuzji z sFRP-4 mają zmniejszone ilości nerek-białka kensyniny (górny panel) i zwiększony fosforylowany sygnał (3-kateniny (dolny panel) w porównaniu z tymi w infuzji z podłożem. Continue reading „Wydzielone białko 4 związane z białkami szprotu jest silnym czynnikiem fosfatycznym pochodzenia nowotworowego ad 7”

Immunoregulacja wirusowego modelu stwardnienia rozsianego z użyciem syntetycznego kannabinoidu R (+) WIN55,212 ad 5

Leczenie R (+) WIN55,212 w momencie infekcji (a) lub przy wystąpieniu choroby klinicznej (b) znacząco hamowało IFN-y sekrecja limfocytów T ponownie poddawana zabiegowi VP270-86 lub PLP139-151 w porównaniu z S (.) WIN55,212 (szare słupki) lub nieleczonymi myszami zakażonymi TMEV (białe słupki). Leczenie R (+) WIN55,212 podczas ustalonej choroby (c) nie miało znaczącego wpływu na IFN-y wydzielanie. * Odpowiedź cytokin była znacząco hamowana w porównaniu z myszami zakażonymi S (.) WIN55,212 lub nieleczonymi TMEV. P <0,05. Leczenie R (+) WIN55,212 powoduje zmniejszenie ekspresji mRNA dla prozapalnych i antywirusowych mediatorów w rdzeniu kręgowym. Continue reading „Immunoregulacja wirusowego modelu stwardnienia rozsianego z użyciem syntetycznego kannabinoidu R (+) WIN55,212 ad 5”

Glikoproteina Tamm-Horsfall łączy wrodzoną aktywację komórek immunologicznych z odpornością adaptacyjną poprzez mechanizm zależny od receptora Toll-4 cd

LPS indukowała ekspresję TF w komórkach HUVEC, podczas gdy THP nie był w stanie indukować TF w komórkach śródbłonka, nawet w traktowanych IFN – y komórkach, które są wysoce wrażliwe na LPS (Figura 2C). Wyniki te sugerują różnicę funkcjonalną w sygnalizacji LPS i THP. Łącznie, te eksperymenty wykluczają możliwość wpływu THP na DC ze względu na zanieczyszczenie LPS. Aby wykluczyć cząsteczki zanieczyszczające inne niż LPS, standardowy preparat THP otrzymany przez powtarzane wytrącanie NaCl z moczu dalej oczyszczono za pomocą 2 kolejnych procedur, wykorzystując fakt, że THP tworzy żel, gdy obecne są jednowartościowe jony powyżej 60 mM. Po indukcji tworzenia żelu przez 70 mM fosforan sodu, THP oczyszczono przez ultrawirowanie (23). Continue reading „Glikoproteina Tamm-Horsfall łączy wrodzoną aktywację komórek immunologicznych z odpornością adaptacyjną poprzez mechanizm zależny od receptora Toll-4 cd”

Supresor sygnalizacji a1 (SOCS1) cytokiny jest nowym celem terapeutycznym dla indukowanego przez enterowirusa uszkodzenia serca ad

Stosowany w tym badaniu wirus Coxsackie B3 (CVB3) pochodził z infekcyjnej kopii cDNA kardiotropowego szczepu H3 (wariant Woodruffa) CVB3 (24). Miana wirusa oznaczano na monowarstwach komórek HeLa przy użyciu standardowego testu tworzenia łysinek, a izolację wirusa z serca i wątroby przeprowadzono w sposób opisany uprzednio (25). Rekombinowane wektory adenowirusowe zawierające geny dla LacZ, znakowanego Myc SOCS1, znakowanego Myc SOCS3 i rekombinazy Cre zostały przygotowane na komórkach 293, jak opisano wcześniej (26). Rekombinowane adenowirusy wyrażające dnSOCS1 sterowane przez promotor CMV wytworzono jak opisano wcześniej (27). Aby wygenerować wektory zawierające adenowirusy (AAV) zawierające dnSOCS1, cDNA znakowanego Myc dnSOCS1 subklonowano do plazmidu AAV, pSub201 (28), pod kontrolą miejsca wczesnego wczesnego promotora CMV pomiędzy odwróconymi powtórzeniami AAV. Continue reading „Supresor sygnalizacji a1 (SOCS1) cytokiny jest nowym celem terapeutycznym dla indukowanego przez enterowirusa uszkodzenia serca ad”

Supresor sygnalizacji a1 (SOCS1) cytokiny jest nowym celem terapeutycznym dla indukowanego przez enterowirusa uszkodzenia serca ad 9

Strategia hamowania SOCS w leczeniu wczesnego uszkodzenia narządu za pośrednictwem wirusa może być również przydatna w przypadku innych chorób wirusowych lub nowotworów, takich jak przewlekłe wirusowe zapalenie wątroby, przewlekła białaczka szpikowa i rak nerkowokomórkowy. Chociaż wykazano, że terapia IFN jest skuteczna w tych stanach, niektórzy pacjenci są oporni na terapię IFN (45, 46). Sakamoto i in. donieśli, że SOCS1 i SOCS3 są silnie eksprymowane bez stymulacji cytokiną i że indukowana przez cytokiny aktywacja JAK-STAT jest znacznie zmniejszona w liniach komórkowych białaczki opornej na IFN, co sugeruje, że zmniejszona aktywacja JAK przez nieprawidłową indukcję SOCS może być mechanizmem oporności na IFN (47). ). Continue reading „Supresor sygnalizacji a1 (SOCS1) cytokiny jest nowym celem terapeutycznym dla indukowanego przez enterowirusa uszkodzenia serca ad 9”