Ukierunkowana delecja CX3CR1 ujawnia rolę fraktalkiny w odrzucaniu aloprzeszczepu serca ad 5

Próbowaliśmy ustalić, czy oddziaływanie Fk i CX3CR1 przyczynia się do uszkodzenia kłębuszkowego i śródmiąższowego w przyspieszonym modelu nefrotoksycznego zapalenia nerek u myszy. Jak zmierzono przez podwyższenie poziomu azotu mocznikowego we krwi, białkomocz i morfologię ilościową, uszkodzenie nerek było równie ciężkie w typie dzikim i CX3CR1 (3). myszy (tabela 1). Chociaż u samic wystąpił mniej uszkodzeń niż u mężczyzn, a nasilenie różniło się pomiędzy zwierzętami w każdej grupie, wszystkie zwierzęta wykazywały pewien stopień zapalenia kłębuszkowego i śródmiąższowego, gdy badano je 14 i 21 dni po immunizacji (tabela 1, figura 5). Poziom azotu mocznikowego we krwi był równie podwyższony od dnia 3 w obu grupach samców i samic myszy i był uporczywie podwyższony u mężczyzn w dniu 21 (Tabela 1). Białkomocz był również obecny w obu grupach samców i samic myszy od dnia 3 i był nie zmniejszony przez niedobór CX3CR1. Istotnie, istniała nieistotna tendencja do zwiększania poziomu wydalania białka w moczu u samic CX3CR1. /. niż u samic myszy CX3CR1 + / + po 14 i 21 dniach (Tabela 1). Ilościowa immunohistochemia dla wszystkich leukocytów, granulocytów, makrofagów i podzbiorów komórek T nie ujawniła różnic między CX3CR1 + / + i CX3CR1 (3 / a. myszy nefrytowe (dane nie pokazane). Figura 5 Histologia kontroli i nerek nerkowych. CX3CR1 + / + (a, c) i CX3CR1. /. (b, d) myszy wstępnie immunizowano normalną surowicą owcy, a następnie wstrzykiwano im dożylnie normalną surowicę owczą lub surowicę nefrotoksyczną. Odcinki nerek zebrane od myszy immunizowanych normalną surowicą owczą wykazują prawidłową morfologię nerek (a, b). Natomiast sekcje korowe uzyskane 21 dni po wstrzyknięciu z surowicą nefrotoksyczną (c, d) wykazują proliferacyjne i zapalne zmiany kłębuszkowe, w tym hiperkomórkowość, martwicę ogniskową, zwiększoną matrycę, pogrubienie pętli kapilarnych i okluzję przez matrycę i mikroukłady, jak również okołokomórkowe śródmiąższowe nacieki komórek jednojądrzastych. (Sekcje parafinowe barwione H & E, oryginalne powiększenie, × 790). Pokazane są reprezentatywne sekcje od 4 do 6 zwierząt na grupę. Tabela Funkcja podstawowa i histologia 14 i 21 dni po immunizacji surowicą nefrotoksyczną w CX3CR1 + / + i CX3CR1. /. samce i samice myszy. EAE. Biorąc pod uwagę doniesienia o podwyższeniu aktywności Fk podczas EAE (9, 26) i ekspresji CX3CR1 przez komórki mikrogleju (6, 27), przetestowaliśmy znaczenie CX3CR1 w patogenezie EAE porównując nasilenie choroby w CX3CR1 + / + i CX3CR1. / . myszy. Jak widać na Figurze 6, nie było istotnej różnicy między grupami w odniesieniu do wyników klinicznych lub występowania choroby (dane nie przedstawione). Figura 6 Brak wymagań dotyczących ekspresji CX3CR1 w rozwoju mysiego EAE. Myszy typu dzikiego i myszy bez CX3CR1 immunizowano peptydem MOG i ważono i oceniano codziennie. W żadnym punkcie nie odnotowano znaczących różnic. Wyniki są reprezentatywne dla dwóch oddzielnych eksperymentów, przy użyciu 10 myszy na grupę w każdym doświadczeniu. Przeżycie allograftu serca. Biorąc pod uwagę wyraźną ekspresję Fk na komórkach śródbłonka i raport o podwyższonej regulacji Fk przez zapalenie tkanki serca (7), staraliśmy się ustalić, czy Fk odgrywa rolę w odrzuceniu aloprzeszczepu serca. Serca dawcy BALB / c (H-2d) wszczepiono całkowicie myszom B6 / 129 (H-2b), których niedopasowane MHC. Na poziomie RNA ekspresja Fk była indukowana w przeszczepionym sercu już dzień po przeszczepie i była maksymalnie podwyższona do 3 dnia (Figura 7a). Na poziomie białka zarówno Fk, jak i CX3CR1 wykryto w złożach kapilarnych serc odrzucających (ryc. 7, d i e), ale nie w sercach kontrolnych (ryc. 7b). Aby sprawdzić, czy Fk odgrywa rolę w procesie odrzucania, porównaliśmy przeżycie CX3CR1. /. i myszy biorców CX3CR1 + / + po przeszczepieniu serca. W przypadku braku immunosupresji, nie było różnicy w przeżywalności przeszczepu między dwoma genotypami (Figura 8). Jednak w obecności CsA nastąpiło znaczne wydłużenie czasu przeżycia przeszczepu w CX3CR1. /. myszy (Figura 8). Badanie histologiczne serca ujawniło znaczące nacieki komórkowe u biorców CX3CR1 + / + (z lub bez CsA) i CX3CR1. /. biorcy pod nieobecność CsA, ale nie w CX3CR1. /. myszy leczone CsA (figura 9). Biorąc pod uwagę nasze dane dotyczące ekspresji CX3CR1 przez mysie komórki NK i monocyty, przeprowadziliśmy seryjną analizę infiltracji przez te typy komórek po transplantacji serca (Figura 10). Wczesna rekrutacja komórek NK obserwowana w 3 dniu po przeszczepie była zmniejszona w CX3CR1. /. Przeciw biorcom allograftu CX3CR1 + / + (P <0,001), a zastosowanie CsA dodatkowo zmniejszyło liczbę komórek NK w CX3CR1 (3). biorcy (P <0,05 dla CX3CR1a / y otrzymujących CsA vs [przypisy: tomaszowskie centrum zdrowia, badania kontrolne po urlopie macierzyńskim, olej lniany na odchudzanie ] [podobne: ile kalorii ma mozzarella, profilaktin koncentracja, paznokcie w kształcie migdałów ]