Utrata antagonisty BMP USAG-1 łagodzi choroby w mysim modelu postępującej dziedzicznej choroby nerek Zespół Alporta ad 5

Densa plamki jest częścią dalszych kanalików kontaktujących się ze swoim kłębuszkiem pochodzenia i sąsiadującym z komórkami mezangialnymi. Barwienie (C) a-Gal, jak również barwienie immunologiczne z przeciwciałem anty-LacZ, kolokalizowane za pomocą barwienia immunologicznego przeciwciałem anty-nNOS (marker dla plamki żółtej) w nerkach myszy Usag1 + / LacZ i myszy Bmp7 + / LacZ. Odcinek nerki od myszy WT był również traktowany w taki sam sposób, z odcinkami od myszy Usag1 + / LacZ i myszy Bmp7 + / LacZ i nie wykazywał żadnego wybarwienia p-galu. Pręty skali: 100 .m. (D) Analiza RT-PCR w czasie rzeczywistym mMNA MMP-12 w hodowanych komórkach mezangialnych leczonych zapalnie cytokinami. Poziomy ekspresji znormalizowano do poziomów GAPDH i wyrażono w stosunku do tych w kontrolach. TGF-. znacznie zwiększona ekspresja mRNA MMP-12 w komórkach mezangialnych. Wykres odzwierciedla dane, które są reprezentatywne dla wyników 4 niezależnych eksperymentów. (E) Real-time RT-PCR analizy mRNA MMP-12 w hodowanych komórkach mezangialnych, które inkubowano z TGF-a, BMP-7 i USAG-1. BMP-7 hamował indukcję TGF-. indukowaną MMP-12 w komórkach mezangialnych, a USAG-1 odwracało działanie BMP-7. Wykres odzwierciedla dane, które są reprezentatywne dla wyników 4 niezależnych eksperymentów. USAG-1 kolokalizuje z BMP-7 w plamce żółtej. Niedobór USAG-1 znacząco osłabiał patologię kłębuszkową w Col4a3. /. mysi model zespołu Alport pomimo braku ekspresji USAG-1 w kłębuszkach. Dalsze eksperymenty skupiały się na części dystalnej kanalika, która weszła w kontakt z własnym kłębuszkiem, plamką żółtą (Figura 6B). W celu określenia, czy USAG-1 ulega ekspresji w komórkach plamki żółtej, przeprowadziliśmy dwukrotne barwienie nNOS, swoistego markera dla plamki żółtej, i a-gal z użyciem myszy Usag1 + / LacZ. Jak pokazano na Figurze 6C, barwienie a-galu, jak również barwienie immunologiczne z przeciwciałem anty-LacZ kolokalizowano z barwieniem nNOS, co wskazuje, że USAG-1 wyrażono w plamce żółtej. BMP-7 ulega ekspresji w kanalikach dystalnych, zwiniętych, łączących kanaliki, zbierających kanały i podocytach (26). barwienie a-galu, jak również barwienie immunologiczne z przeciwciałem anty-LacZ również kolokalizuje się z nNOS w nerkach myszy Bmp7 + / LacZ, wskazując na ekspresję BMP-7 w plamce żółtej (Figura 6C). Zatem USAG-1 kolokalizuje z BMP-7 w komórkach plamki żółtej. BMP-7 hamował indukcję TGF-y indukowaną MMP-12 w komórkach mezangialnych, a USAG-1 antagonizował działanie BMP-7. Plamka żółtawa, w której eksprymowane są zarówno USAG-1, jak i BMP-7, sąsiaduje z komórkami mezangialnymi we własnym kłębuszku (Figura 6B). Aby zbadać potencjalne mechanizmy, które są odpowiedzialne za korzystny efekt niedoboru USAG-1 w zespole Alport, zbadano wpływ BMP-7 i USAG-1 w hodowanych komórkach mezangialnych. Ekspresja MMP-12 w hodowanych komórkach mezangialnych była regulowana w górę przez podawanie IL-1 (3. i TGF-y, ale nie przez podawanie MCP-1 (Figura 6D), pomimo tego, że raportowano, że MCP-1 stymuluje ekspresję MMP-12 w podocytach (29). Podawanie BMP-7 powodowało supresję TGF-. indukowaną MMP-12 w komórkach mezangialnych, a jednoczesne podawanie USAG-1 antagonizowało tłumiące działanie BMP-7 (Figura 6E). Wyniki te wskazują, że USAG-1 może zwiększać ekspresję MMP-12 w kłębuszkach nerkowych poprzez hamowanie hamującego działania BMP-7 i nasilanie progresji choroby kłębuszkowej w zespole Alporta. Dyskusja Badanie to pokazuje, że USAG-1 przyspiesza patogenezę kłębuszków w mysim modelu ludzkiego zespołu Alport, prawdopodobnie przez przesłuch między kanalikami nerkowymi a własnym kłębuszkiem nerkowym. Usag1. /. Col4a3. /. myszy wykazały atenuowany postęp choroby kłębuszkowej i zachowaną czynność nerek w porównaniu z Usag1 + / + Col4a3. /. myszy i znacznie zmniejszyła ekspresję i aktywność MMP, które odgrywają kluczową rolę w postępie choroby w zespole Alport. Ponadto, USAG-1 i BMP-7 skolonizowały w plamce żółtej, części dalszych kanalików w kontakcie z jej własnym kłębuszkiem, i BMP-7 zmniejszał ekspresję MMP-12 w komórkach mezangialnych, które były antagonizowane przez USAG-1. USG-1 nasila uszkodzenie kłębuszków, jak również zwłóknienie śródmiąższowe rurkowe. Uszkodzenie cylindryczne i zwłóknienie śródmiąższowe są ostatnimi powszechnymi drogami prowadzącymi do schyłkowej niewydolności nerek (ESRD) (38, 39), niezależnie od charakteru początkowego uszkodzenia nerek, a stopień uszkodzenia cewek odpowiada upośledzeniu czynności nerek (39).
[patrz też: profilaktin koncentracja, rak płaskonabłonkowy płuca, depilacja laserowa twarzy ]
[hasła pokrewne: szczepionki na meningokoki, polana szymoszkowa basen, ile kalorii ma mozzarella ]