Utrata antagonisty BMP USAG-1 łagodzi choroby w mysim modelu postępującej dziedzicznej choroby nerek Zespół Alporta ad 7

Macula densa, część dalszych kanalików, leży obok pozagałkowych komórek mezangialnych, a jądra komórek plamki żółtej są zlokalizowane apikalnie, co sugeruje możliwość wydzielania substancji (niebieskiego) z błony podstawnej z densą plamki żółtej. Należy zauważyć, że błona podstawna komórek plamki żółtej jest ciągła z błoną podstawną pozagałkowych komórek mezangialnych. (B) W Usag1 + / + Col4a3. /. myszy (WT / KO), komórki mezangium są aktywowane (purpurowe) i wydzielają MMP (nożyczki), które degradują GBM. Po zniszczeniu GBM, podocyty znajdujące się w GBM są uszkodzone (brązowe) i obserwuje się albuminurię. BMP-7 (niebieski) wydzielany z plamki żółtej jest wychwytywany przez USAG-1, który jest również wydzielany z plamki żółtej. W konsekwencji BMP-7 nie może związać się z receptorami i wywierać działania renoprotekcyjnego. W Usag1. /. Col4a3. /. myszy (KO / KO), BMP-7 wydzielany z plamki żółtej może wiązać się z jej receptorami na komórkach mezangialnych i podocytach i chronić wrażliwy GBM przed degradacją. Jak pokazano na Fig. 6C, zarówno USAG-1, jak i BMP-7 ulegają ekspresji w plamce żółtej, a USAG-1 wydzielany z błony podstawno-bocznej plamki żółtej może zahamować działanie BMP-7 na sąsiadujące komórki mezangialne. W doświadczeniach z użyciem hodowanych komórek mezangialnych, BMP-7 znacząco osłabiał indukowaną TGF-. indukcję MMP-12, a efekt hamujący BMP-7 został zniesiony przez dodanie USAG-1. Ponadto, BMP-7 zmniejszał cytotoksyczność indukowaną TGF – y w komórkach mezangialnych (dane nie przedstawione). Zatem, USAG-1 może zaostrzyć patogenezę kłębuszków w zespole Alporta poprzez przyspieszanie regulacji uplastycznienia enzymu degradującego GBM i cytotoksyczności poprzez hamowanie reno-ochronnego działania BMP-7 (Figura 7B). Alternatywną możliwością, która może wyjaśnić wpływ USAG-1 na uszkodzenie kłębuszków nerkowych, jest interakcja między krążącym USAG-1 i BMP-7 w osoczu. BMP-7 jest obecny w osoczu w zakresie stężeń od 100 do 300 pg / ml (12). Ze względu na brak skutecznego systemu ELISA, pozostaje ustalenie poziomu USAG-1 w osoczu. Jeśli odpowiednia ilość USAG-1 jest obecna w krążeniu, może zatem wiązać się z BMP-7 i tym samym hamować jego aktywność. Aby przetestować wpływ krążenia USAG-1 na progresję Col4a3. /. myszy, przeprowadziliśmy systemowy transfer genów wektora ekspresyjnego USAG-1 do Usag1 A / A Col4a3 A /. myszy i wykazano, że różnica w albuminurii między grupą przeniesienia genów a grupą kontrolną nie była statystycznie istotna (Suplementowa Figura 3). Nowe podejście terapeutyczne do zespołu Alporta. Obecnie nie ma definitywnej terapii zapobiegającej lub spowalniającej rozwój choroby nerek w zespole Alporta. Kilka badań wykorzystujących mysi model zespołu Alporta dostarczyło potencjalnych terapii, takich jak inhibitor MMP (29, 40), inhibitor enzymu konwertującego angiotensynę (56), statyny (57), przeszczep komórek macierzystych pochodzących z szpiku kostnego (58. 60 ) i napromienianie całego ciała (61). Wyniki niniejszego badania potwierdzają pogląd, że próby terapeutyczne mające na celu hamowanie funkcji USAG-1 mogą stać się nowatorskim podejściem terapeutycznym w zespole Alportu, samodzielnie lub w połączeniu z innymi podejściami. Próba terapeutyczna ukierunkowana na USAG-1 jest obiecująca, ponieważ oczekuje się, że będzie skuteczna zarówno w uszkodzeniach kłębuszkowych, jak i cylindrycznych, jest bardziej specyficzna dla nerek i ma mniej efektów zewnątrznerkowych, ponieważ ekspresja USAG-1 ogranicza się do nerki. Metody Myszy. The Usag1. /. Myszy użyte w tym badaniu zostały opisane wcześniej (27) i Col4a3. /. myszy zakupiono w Jackson Laboratory (szczep myszy JAX 129-Col4a3tm1Dec / J) (62). Usag1. /. Col4a3. /. myszy zostały wygenerowane przez hodowlę Usag1 + /. i Col4a3 + /. myszy. Col4a3. /. – myszy z miotu (myszy Usag1 + / + Col4a3 (3 /) i myszy z miotu WT (myszy Usag1 + / + Col4a3 + / +) służyły jako kontrole. Wszystkie badania na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komitet Badań nad Zwierzętami, Graduate School of Medicine, Kyoto University i wykonane zgodnie z wytycznymi Uniwersytetu w Kioto. Dopasowane do wieku myszy zostały użyte do wszystkich badań. Wiek myszy użytych w każdym eksperymencie opisano poniżej. Ocena albuminurii. Myszy umieszczono w klatkach metabolicznych i mocz zebrano w ciągu 24 godzin. Podczas pobierania moczu myszy miały swobodny dostęp do jedzenia i wody. Stężenie albuminy w moczu mierzono za pomocą zestawu do oznaczania Albuwell M (Exocell). Histopatologia nerkowa i mikroskopia elektronowa. Nerki zostały utrwalone w roztworze Carnoya i zatopione w parafinie. Skrawki (o grubości 2 urn) wybarwiono PAS do rutynowego badania histologicznego, a stopień zmiany morfologicznej określono dla dziesięciu 10-tygodniowych myszy i pięciu 6-tygodniowych myszy na grupę przez doświadczonych patologów, którzy byli ślepi na genotypy
[hasła pokrewne: paznokcie w kształcie migdałów, depilacja laserowa twarzy, szczepionki na meningokoki ]
[więcej w: witamina c lewoskrętna wikipedia, osocze bogatopłytkowe opinie, tomaszowskie centrum zdrowia ]