Utrata antagonisty BMP USAG-1 łagodzi choroby w mysim modelu postępującej dziedzicznej choroby nerek Zespół Alporta ad

Obserwacje w tym badaniu sugerują, że USAG-1 może przyczyniać się do patogenezy uszkodzenia nerek przez mechanizm, który uważamy za nowy, obejmujący przesłuch między plamką żółtą dystalnych kanalików i mezangium przynależnego kłębuszka nerkowego. Ponadto wykazujemy, że w nerce Col4a3. /. myszy, TGF-. sygnalizacja obejmuje fosforylację Smad1 / 5/8, czynniki transkrypcyjne klasycznie uważane za dalszy efekt sygnalizacji BMP. Wyniki Utrata ilości USAG-1 spowalnia progresję uszkodzenia kłębuszków u myszy Alport. Col4a3. /. myszy, model mysiego ludzkiego zespołu Alporta, rozwijają się postępujące zapalenie kłębuszków nerkowych związane ze zwłóknieniem kanalikowo-śródmiąższowym prowadzące do niewydolności nerek. Nerki od Col4a3. /. myszy wykazały nieregularne zgrubienie i rozszczepienie GBM w 4 tygodniu życia za pomocą mikroskopii elektronowej. W wieku 5 tygodni rozpoczyna się białkomocz, aw wieku 6 tygodni obserwuje się niewielkie uszkodzenie kłębuszkowe za pomocą mikroskopu świetlnego. W wieku 10 tygodni obserwuje się ciężkie zmiany kłębuszkowe związane ze zwłóknieniem kanalikowo-śródmiąższowym i pogarsza się czynność nerek. Aby przetestować rolę USAG-1 w progresji schyłkowej niewydolności nerek, pochodzącej z uszkodzenia kłębuszkowego, wytworzono myszy z niedoborem zarówno genu Col4a3, jak i genu Usag1 (myszy Usagl . / A Col4a3 (3 / y). Badanie histologiczne nerek z Usag1 + / + Col4a3. /. u myszy wykryto stwardnienie rozsiane i krwotok śródpiersia w wieku 6 tygodni, podczas gdy zmiany te były prawie całkowicie nieobecne u Usag1. /. Col4a3. /. myszy (Figura 1, A i B). W wieku 10 tygodni Usag1 + / + Col4a3. /. u myszy wykazano stwardnienie kłębków nerkowych związane z naciekiem komórek zapalnych, zwłóknieniem śródmiąższowym, atrofią cewkową i tworzeniem odlewu, podczas gdy zmiany te znacznie zmniejszyły się w Usagl . /. Col4a3. /. myszy (Figura 1, A i C). Rysunek 1Usag1. /. Col4a3. /. myszy wykazywały mniejsze uszkodzenie kłębuszków i cewek. (A) Reprezentatywne wyniki histologiczne w Usag1 + / + Col4a3. /. myszy (WT / KO) i Usag1. /. Col4a3. /. myszy (KO / KO) w wieku 6 tygodni i 10 tygodni. Pręty skali: 100 .m. (B i C) Ilościowa ocena liczby kłębuszków nerkowych, odsetków sklerotycznych i krwotocznych kłębuszków oraz znamionowego włóknienia śródbłonka w Usag1 + / + Col4a3. /. myszy (WT / KO) i Usag1. /. Col4a3. /. myszy (KO / KO) po 6 tygodniach (B, n = 5) i 10 tygodniach życia (C, n = 10). Bary oznaczają średnią. SD. ** P <0,01; *** P <0,05. (D) Mikrofotografie elektroniczne w Usag1 + / + Col4a3. /. myszy (WT / KO) i Usag1. /. Col4a3. /. myszy (KO / KO) w wieku 4 tygodni i 10 tygodni. Strzałki wskazują podział GBM. Pręty skali: 5 m. (E) Immunobarwione dla kolagenu a (IV) i a 3 (IV) w kłębuszkach współdziałających z miotami WT (WT / WT), Usag1 + / + Col4a3. /. myszy (WT / KO) i Usag1. /. Col4a3. /. myszy (KO / KO) w wieku 6 tygodni. Podocin był używany jako znacznik podocytów. Zwróć uwagę na pozytywne barwienie kolagenu. (IV) wraz z GBM Usag1 + / + Col4a3. /. myszy (WT / KO) i Usag1. /. Col4a3. /. myszy (KO / KO), podczas gdy barwienie ogranicza się do obszarów mezangialnych w kłębuszkach miotów z miotu WT. Ultrastrukturalna analiza GBM przy użyciu transmisyjnej mikroskopii elektronowej w wieku 4 tygodni wykazała, że Usag1 + / + Col4a3. /. myszy miały rozległe rozszczepienie GBM, podczas gdy Usag1. /. Col4a3. /. myszy wykazały prawie normalną strukturę GBM (Figura 1D). Usag1. /. Col4a3. /. myszy w wieku 10 tygodni również wykazywały znaczącą ochronę struktury GBM w porównaniu z dopasowanym wiekiem Usag1 + / + Col4a3. /. myszy (Figura 1D). Przeprowadzono immunobarwienie kolagenu (1 (IV) lub a3 (IV) w celu porównania lokalizacji kolagenu (IV) kłębuszkowego w obu genotypach (Figura 1E). Ekspresję kolagenu a (IV) wykryto w GBM zarówno Usag1 + / + Col4a3 (3 / a). i Usag1. /. Col4a3. /. myszy, podczas gdy ekspresja była ograniczona do obszaru mezangialnego myszy WT. Ekspresja kolagenu. 3 (IV) była nieobecna w GBM zarówno Usag1 + / + Col4a3. /. i Usag1. /. Col4a3. /. myszy, podczas gdy ekspresję wykryto wzdłuż GBM u myszy WT. Dlatego też, niezależnie od obecności lub nieobecności USAG-1, nie obserwowano zmian w lokalizacji kłębuszkowej kolagenu (IV). Usag1. /. Col4a3. /. myszy wykazywały mniej albuminurii, zachowaną czynność nerek i dłuższą żywotność. Analizę wydalania albuminy z moczem w wieku 6 tygodni pokazano na ryc. 2A, wykazując znacznie mniej albuminurii u Usag1a / A Col4a3. /. myszy niż w Usag1 + / + Col4a3. /. myszy. Skurczowe ciśnienie krwi Usag1. /. Col4a3. /. myszy w 5 tygodniu życia były nieco niższe niż u myszy Usag1 + / + Col4a3. /. myszy (dodatkowa ilustracja 2, materiał uzupełniający dostępny online w tym artykule; doi: 10.1172 / JCI39569DS1) [podobne: kamikadze, pompa insulinowa refundacja, podkolanówki kompresyjne ] [hasła pokrewne: odchudzanie roku vita slim opinie, balsam kapucyński ulotka, pompa insulinowa refundacja ]