Wydzielone białko 4 związane z białkami szprotu jest silnym czynnikiem fosfatycznym pochodzenia nowotworowego ad 7

Aby określić mechanizm działania sFRP-4 w nerkach, mierzono stężenia. -Keteniny lub fosforylowanej .-keteniny w sFRP-4. lub nerki traktowane nośnikiem in vivo. Jak pokazano na Fig. 5, szczury w infuzji z sFRP-4 mają zmniejszone ilości nerek-białka kensyniny (górny panel) i zwiększony fosforylowany sygnał (3-kateniny (dolny panel) w porównaniu z tymi w infuzji z podłożem. Figura 5 Zachodnie blot homogenatów nerkowych otrzymanych od szczurów, którym podawano podłoże (kontrolę) lub sFRP-4 przez 8 godzin. Abs wobec (3-kateniny (górny panel) lub fosforylowanej P-kateniny (fosfo-kateniny) (dolny panel) zastosowano do wykrywania białek, jak opisano w Metodach. Dyskusja TIO jest paranowotworowym zaburzeniem polegającym na wyniszczaniu fosforanów nerkowych, charakteryzującym się niedotlenieniem, fosfaturem i nieprawidłowo prawidłowymi lub niskimi stężeniami 1, 25-dihydroksywitaminy D w surowicy, które prowadzą do osteomalacji lub krzywicy, osłabienia mięśni i ogólnego osłabienia (1. 8). W TIO stężenia wapnia w surowicy, PTH i PTHrP są zwykle prawidłowe. Uważa się, że guzy mezenchymatyczne, które powodują TIO, rozwijają czynnik krążący, który powoduje wspomniane powyżej zaburzenia metaboliczne (1. 8). Całkowite usunięcie guzów wiąże się z korektą nieprawidłowości biochemicznych i szkieletowych. Wcześniej wykazaliśmy, że guz związany z tym zespołem opracował nowy czynnik (czynniki) odpowiedzialne za zmniejszoną reabsorpcję fosforanu nerkowego (2). Ostatnie prace sugerują, że FGF-23 jest cząsteczką podobną do fosfatoniny. Oprócz ekspresji w nowotworach związanych z osteomalacją (13, 15, 33), poziom FGF-23 w surowicy jest zwiększony u niektórych pacjentów z TIO i powiązanymi z chromosomem X hipofosfatemią (XLH) (19), zespołem o cechach fenotypowych podobnych do TIO (34). Podwyższone stężenie FGF-23 w surowicy pacjentów z TIO zmniejsza się po usunięciu guza i przywróceniu stanu klinicznego do normy (19). FGF-23 zmniejsza wychwyt fosforanu w komórkach OK w hodowli (12, 35) i może być substratem dla enzymu PHEX (12), który jest zmutowany u pacjentów z XLH (36). Shimada i in. wykazali, że rekombinowany FGF-23 zmniejsza stężenia fosforanu w surowicy i zwiększa straty fosforanu w moczu po podaniu myszom (13). Ponadto, nagie myszy wszczepione ustaloną linią komórkową eksprymującą FGF-23 rozwijają osteomalację. Transgeniczne myszy z nadekspresją FGF-23 mają hipofosfatemię i zwiększone wydalanie fosforanu z moczem (37), a myszy z mutacją zerową pozbawione genu FGF-23 są hiperfosfatematyczne (38). Wreszcie, aktywujące mutacje FGF-23 są odpowiedzialne za autosomalną dominującą krzywicę hypofosfatemiczną (ADHR) (17, 39, 40), która ma również cechy kliniczne podobne do TIO i XLH. Mutacje ADHR są związane ze zwiększoną stabilnością i / lub aktywnością białka FGF-23 (16. 18, 40). Nasze podejście do identyfikacji potencjalnych kandydatów na fosfatatynę polegało na przeprowadzeniu kompleksowego profilu ekspresji genów w czterech nowotworach związanych z wyniszczaniem fosforanów i porównaniu tych profili z podobnymi guzami mezenchymalnymi niezwiązanymi z TIO. Przebadaliśmy kilka guzów związanych z zespołem TIO pod kątem obecności genów ulegających zróżnicowanej ekspresji przy użyciu techniki SAGE (21, 41, 42). Zidentyfikowaliśmy kilka genów, które ulegały ekspresji preferencyjnie w nowotworach związanych z osteomalacją, ale nie w tkankach kontrolnych. Obejmowały one FGF-23, MEPE, białko macierzy zębiny i wydzielany FRP-4. Ponieważ sFRP-4 jest wydzielaną cząsteczką, postawiliśmy hipotezę, że to białko może wejść do krążenia i zredukować reabsorpcję fosforanu w nerce. Aby przetestować tę hipotezę, przeprowadziliśmy biosyntetyzację sFRP-4 i wykazaliśmy, że specyficznie hamuje on zależny od sodu wychwyt fosforanu w hodowlanym nabłonku nerek opuszki nerkowej (Figura 1). Ponadto wykazaliśmy, że infuzja sFRP-4 do szczurów wiąże się z 2,5- do 3-krotnym wzrostem wydalania z moczem fosforanu (rysunek 2, tabela 1). W ostrych doświadczeniach nastąpił wzrost wydalania sodu, który prawdopodobnie jest wtórny do samej infuzji i jest niezależny od sFRP-4, ponieważ nie jest widoczny u zwierząt, którym podawano infuzję sFRP-4 przez okres 8 godzin. Wydalanie frakcyjne z moczem wapnia i wydalanie cAMP w moczu nie ulegają zmianie. Wlew sFRP-4 przez okres 4 8 godzin był związany ze zmniejszeniem stężenia fosforanów w surowicy. Tak więc to białko jest zdolne do powodowania hiperhosphaturii i hipofosfatemii in vivo. Aby określić, czy efekty fosfatrii sFRP-4 są zależne od PTH, infuzowaliśmy sFRP-4 u szczurów z ostrymi TPTX i wykazaliśmy, że nastąpiło trzykrotne zwiększenie wydalania fosforanu (Figura 3).
[hasła pokrewne: paznokcie w kształcie migdałów, centrum onkologii warszawa roentgena, badania kontrolne po urlopie macierzyńskim ]
[hasła pokrewne: paznokcie w kształcie migdałów, ból piszczeli po bieganiu, witamina c lewoskrętna wikipedia ]